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更新時間：2025-12-19
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一、產品描述
英文名稱：Anti-Motilin Antibody
中文名稱：抗MTLN多克隆抗體
貨號：STJ195701-200ug
規格：200 µg
類型：凍干粉或液體形式
本產品為抗MTLN抗體（Anti-MTLN antibody），針對人源MTLN蛋白設計，經序列比對驗證，亦可交叉識別部分哺乳動物（如小鼠、大鼠）的MTLN同源蛋白（具體交叉反應性請參考批次檢測報告）?？贵w純度≥95%，經SDS-PAGE和高效液相色譜（HPLC）驗證；內毒素含量<1.0 EU/µg，確保適用于細胞培養及體內實驗（如適用）。每批次產品均附帶詳細質檢報告（CoA），包含濃度、純度、特異性、效價及應用驗證數據，保障實驗結果的可靠性與可重復性。
二、產品特點
1. 高特異性識別：本抗體采用重組人MTLN蛋白或其關鍵抗原表位肽段免疫宿主，經親和層析純化，能特異性識別天然及變性狀態下的MTLN蛋白，顯著降低非特異性背景信號。
2. 多平臺兼容性：已驗證適用于Western Blot、IHC、IF、ELISA、IP等多種主流免疫檢測技術，滿足不同實驗需求。
3. 批次間一致性優異：St John's Laboratory實施嚴格的生產質控體系，確保不同批次產品在效價、特異性和靈敏度方面高度一致，減少實驗重復成本。
4. 低交叉反應性：經BLAST比對及實驗證實，本抗體與胃泌素（Gastrin）、膽囊收縮素（CCK）、胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）等結構或功能相近的胃腸激素無明顯交叉反應。
5. 靈活保存形式：提供凍干粉（便于長期運輸與儲存）或含保護劑的液體形式，用戶可根據實驗安排選擇。
6. 詳盡技術支持：每份產品配套完整的使用指南、推薦稀釋比例及Troubleshooting建議，并可通過或郵件獲取專業技術支持。
三、儲存條件
為確?？贵w活性與穩定性，請嚴格按照以下條件儲存：
· 未開封產品：若為凍干粉形式，應于-20°C干燥避光保存，有效期通常為24個月；若為液體形式，可于-20°C長期保存（避免反復凍融），或于4°C短期保存（≤1個月）。
· 復溶后抗體：凍干粉需用無菌去離子水或推薦緩沖液按說明書指示體積復溶。復溶后建議分裝為單次使用量，于-20°C或-80°C保存，避免反復凍融導致效價下降。4°C保存的復溶抗體應在1周內使用完畢。
· 工作液：稀釋后的抗體工作液不建議長期保存，應現配現用。若必須保存，可于4°C避光存放不超過48小時。
注意事項：所有操作過程應避免強光直射、劇烈震蕩及污染。解凍時建議置于冰上緩慢融化，切勿37°C快速解凍。
四、工作原理
抗MTLN抗體的工作原理基于抗原-抗體的高度特異性結合。MTLN作為一種分泌型小分子肽，在樣本制備過程中可被釋放并保持其抗原表位完整性。本抗體通過其可變區（VH/VL）精準識別MTLN蛋白上的特定線性或構象表位，形成穩定的抗原-抗體復合物。
在不同實驗平臺中，該結合事件被轉化為可檢測信號：
Western Blot：抗體與轉印至膜上的MTLN結合后，通過酶標二抗催化底物顯色，實現目標條帶可視化。
免疫組織化學（IHC）：抗體與組織切片中內源性MTLN結合，經顯色系統產生棕褐色沉淀，定位MTLN在胃腸道特定細胞中的表達。
免疫熒光（IF）：熒光標記二抗與一抗結合，在共聚焦顯微鏡下顯示MTLN的亞細胞分布。
ELISA：包被板捕獲樣本中MTLN，加入本抗體后形成“夾心"復合物，通過酶促反應定量MTLN濃度。
該抗體的高親和力確保了即使在低豐度表達條件下也能有效檢測MTLN，為研究其在生理或病理狀態下的動態變化提供可靠工具。
五、解決實驗中的哪些問題
1. MTLN表達水平檢測困難：由于MTLN為小分子肽且在組織中表達量較低，常規抗體易出現假陰性。本抗體經優化篩選，具備高靈敏度，可有效檢測pg級MTLN。
2. 非特異性條帶干擾：在Western Blot中，常因抗體交叉反應出現雜帶。本產品經多輪吸附純化，顯著降低非特異結合，獲得清晰單一目標條帶。
3. 組織定位模糊：IHC實驗中，MTLN陽性信號易被背景掩蓋。本抗體配合優化的抗原修復方案，可清晰顯示十二指腸隱窩底部Mo細胞的特異性染色。
4. 批次差異導致結果不可重復：St John's Laboratory的標準化生產流程確保每批次抗體性能穩定，減少因試劑變異導致的實驗失敗。
5. 低豐度樣本檢測限不足：在血清、腸腔灌洗液等體液樣本中，MTLN濃度極低。本抗體適用于高靈敏ELISA平臺，檢測下限可達10 pg/mL。
六、使用方法
以下為通用操作指南，具體參數請根據實驗類型及樣本特性優化：
1. Western Blot
樣本制備：取新鮮組織或細胞，加入RIPA裂解液，冰上裂解30分鐘，12,000×g離心15分鐘，取上清。
電泳：建議使用Tris-Tricine SDS-PAGE膠，上樣量20–50 µg總蛋白。
轉膜：0.22 µm PVDF膜，100 V恒壓轉膜60分鐘（冰浴）。
封閉：5%脫脂奶粉/TBST，室溫1小時。
一抗孵育：本抗體用TBST稀釋，4°C孵育過夜。
二抗孵育：HRP標記抗兔/鼠IgG，室溫1小時。
顯色：ECL化學發光，X光片或成像系統曝光。
2. 免疫組織化學（IHC）
切片脫蠟水化：二甲苯→梯度乙醇→PBS。
抗原修復：檸檬酸鈉緩沖液（pH6.0），高壓鍋加熱2分鐘，自然冷卻。
阻斷內源性過氧化物酶：3% H?O?，室溫10分鐘。
血清封閉：5%正常山羊血清，室溫30分鐘。
一抗孵育：抗體稀釋液，4°C過夜。
二抗及顯色：按試劑盒說明操作，DAB顯色，蘇木精復染。
3. ELISA
包被：MTLN標準品或樣本加入預包被捕獲抗體的96孔板。
檢測抗體：本抗體作為檢測抗體（1:1000稀釋），37°C孵育1小時。
顯色讀數：按ELISA試劑盒流程操作。
七、常見問題與解決方案
Q1：Western Blot未見目標條帶
A：可能原因包括抗體稀釋度過高、樣本中MTLN表達量過低、電泳條件不適合小分子蛋白或轉膜效率差。建議：降低稀釋比至1:200；確認樣本來源；改用Tris-Tricine膠；延長轉膜時間或增加電流；設置陽性對照。
Q2：IHC背景過高
A：可能因封閉不充分、一抗濃度過高或內源性生物素干擾。建議：延長封閉時間至1小時；梯度測試一抗稀釋度；使用生物素阻斷試劑；增加洗滌次數。
Q3：非特異性條帶出現
A：可能源于抗體交叉反應或樣本降解。建議：提高封閉液濃度；添加0.1% Tween-20至抗體稀釋液；使用新鮮蛋白酶抑制劑；驗證抗體特異性。
Q4：IF信號微弱
A：可能因透化不充分、抗體穿透性差或熒光淬滅。建議：優化透化劑濃度；延長一抗孵育時間（48小時）；使用抗淬滅封片劑；檢查熒光顯微鏡濾光片匹配性。
Q5：ELISA標準曲線不理想
A：可能因標準品溶解不當、抗體失活或孵育溫度波動。建議：標準品用含0.1% BSA的PBS溶解；避免抗體反復凍融；確保孵育箱溫度恒定（37±0.5°C）；每板設復孔及空白對照。
Q6：抗體沉淀或渾濁
A：可能因保存不當導致蛋白聚集。建議：離心（12,000×g, 5分鐘）取上清使用；避免4°C長期存放液體抗體；復溶時緩慢加入緩沖液并輕柔混勻。
八、免責聲明
1. 本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理，僅個人觀點，具體以品牌信息文檔為準。
2. 本產品僅供科學研究使用，不得用于任何臨床診斷、治療、預防或人體/動物體內注射用途。
3. St John's Laboratory已盡努力確保產品信息準確，但不對因使用本產品導致的直接或間接損失承擔責任。
4. 用戶應自行驗證抗體在特定實驗體系中的適用性，包括樣本類型、處理方法及檢測平臺。
5. 產品性能受儲存、操作及環境因素影響，不當使用導致的失效不在保修范圍內。
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